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一. 背景

洋蔥伯克霍爾德菌，拉丁名：Burkholderia cepacia (B. cepacia)，原屬假單胞菌屬（Pseudomonas cepacia），是植物病原菌，因引起植物患病而得名，1971年首次有引起人類感染的報(bào)道。是囊性纖維化（CF）患者和慢性肉芽腫性病患者的條件致病菌。
 

參照PDA TR67中:“表2：與產(chǎn)品召回、非無菌制劑引起的感染及臨床感染相關(guān)的常見微生物種類”，與洋蔥伯克霍爾德菌有關(guān)的產(chǎn)品召回事件在所有召回事件中（N=144）占據(jù)首位（出現(xiàn)34 次），也占據(jù)著大眾視野。該菌已經(jīng)被美國FDA列為不可接受微生物。



二. 生長特性

（1） 洋蔥伯克霍爾德菌為需氧非發(fā)酵菌，最適生長溫度為30-35℃；革蘭氏染色，在顯微鏡下觀察，為革蘭氏陰性無芽孢桿菌；

（2） 氧化酶試驗(yàn)：遲緩性氧化酶陽性（紫紅色、紫色或者深藍(lán)色），反應(yīng)時間為2-10min；

（3） 過氧化氫酶試驗(yàn)：洋蔥伯克霍爾德菌為遲緩產(chǎn)氣，1s后緩慢出現(xiàn)氣泡；

（4） 蔗糖氧化陽性；枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)陽性；七葉苷利用陽性；

（5） 在藥品檢驗(yàn)用非選擇性培養(yǎng)基中（TSA/TSB/SDA/SDB/NA/NB/R2A）能夠生長良好,在選擇性培養(yǎng)基麥康凱液體（MACB）、麥康凱瓊脂(MACA)和紫紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)基（VRBGA）中能夠生長良好。在CA上25℃培緩慢生長。EE里緩慢生長，RVS和XLD不支持該菌生長。


三. 相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)

 

（1）《SN/T 4684-2016 進(jìn)出口化妝品中洋蔥伯克霍爾德菌檢驗(yàn)方法》

     該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)出口化妝品檢驗(yàn)洋蔥伯克霍爾德菌方法為：分別用含多粘菌素B的SCDLP增菌液和含慶大霉素的BCSA增菌液依次進(jìn)行增菌培養(yǎng)，再分別在BCSA瓊脂（含多粘菌素B和慶大霉素）和麥康凱瓊脂（含多粘菌素B和慶大霉素）平板上進(jìn)行分離培養(yǎng)；最后對疑似菌落進(jìn)行鑒定。

 

（2）《SN/T 4485-2016 進(jìn)出口口腔清潔類產(chǎn)品中洋蔥伯克霍爾德菌檢驗(yàn)方法》

該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)出口口腔清潔類產(chǎn)品中檢驗(yàn)洋蔥伯克霍爾德菌方法為：通過改良LETHEEN氏肉湯增菌培養(yǎng)，再劃線接種在洋蔥伯克霍爾德菌瓊脂上進(jìn)行分離培養(yǎng)，最后對疑似菌進(jìn)行鑒定。

 

（3）USP42<60> MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS—TESTS FOR BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX 

USP42<60>規(guī)定了使用TSB對樣品進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)，在BCSA上劃線選擇性培養(yǎng)。洋蔥伯克霍爾德菌可能存在的指示特征為周圍黃色的綠棕色菌落，或者周圍粉紅色的白色菌落。挑選可疑菌進(jìn)行鑒定。


四. 關(guān)于BCSA培養(yǎng)基（USP）

     
      其中酪胨和酵母提取物提供豐富的氮源，乳糖和蔗糖提供兩種碳源，酚紅指示劑，結(jié)晶紫、萬古霉素抑制革蘭氏陽性菌的生長，慶大霉素抑制部分革蘭氏陰性菌的生長，多粘菌素B可抑制銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌等菌的生長。

     目前，北京三藥針對洋蔥伯克霍爾德菌的檢驗(yàn)開發(fā)了兩種培養(yǎng)基，洋蔥伯克霍爾德菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)（符合USP）和BCC培養(yǎng)基基礎(chǔ)以及對應(yīng)的配套試劑。




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